USMF logo

Institutional Repository in Medical Sciences
of Nicolae Testemitanu State University of Medicine and Pharmacy
of the Republic of Moldova
(IRMS – Nicolae Testemitanu SUMPh)

Biblioteca Stiintifica Medicala
DSpace

University homepage  |  Library homepage

 
 
Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/20.500.12710/26781
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.authorSîtnic, Victor-
dc.contributor.authorNistreanu, Victoria-
dc.contributor.authorSavin, Anatolie-
dc.date.accessioned2024-01-27T11:09:28Z-
dc.date.available2024-01-27T11:09:28Z-
dc.date.issued2023-
dc.identifier.issn2587-3466-
dc.identifier.issn2587-3458-
dc.identifier.urihttps://journal.ohrm.bba.md/index.php/journal-ohrm-bba-md/article/view/654/577-
dc.identifier.urihttp://repository.usmf.md/handle/20.500.12710/26781-
dc.description.abstractIntroducere. Mistrețul aparține genului Susdin familia Suidae și fiind strămoșul porcului domestic se poate încrucișa ușor cu acesta. Hibridizarea între mistreț și porcul domestic crește gradul de invazivitate și afectează integritatea genetică și potențialul de adaptare al mistreților. Deoarece astfel de hibrizi de cele mai multe ori nu pot fi identificați morfologic, există mai multe metode și tehnici moleculare pentru diferențierea acestora de liniile pure. O astfel de metodă este genotiparea pe baza alelelor genei MC1R. Alelismul multiplu al acestei gene poate fi observat fenotipic prin diversitatea pigmentării pielii la porci. În prezent, gradul de hibridizare a mistreților din fauna Republicii Moldova este necunoscut, motivul principal fiind lipsa protocoalelor experimentale de laborator care ar permite identificarea specimenilor hibrizi. Scopul. În prezentul studiu ne-am propus utilizarea dispozitivului Bento Labpentru genotiparea unor specimene de mistreț din Republica Moldova în baza alelelor genei MC1R. Material și metode. Genotiparea a fost realizată prin digestia ampliconilor MC1R cu enzimele de restricție BspHI și BstUI (RFLP-PCR). Au fost prelevate 14 probe de la mistreț din diferite regiuni ale țării. ADN-ul genomic a fost extras conform protocolului GeneJET Genomic DNA Purification Kit, iar amplificarea s-a realizat cu utilizarea primerilor MC1R-FWși MC1R-REV modificați și a mastermixului DreamTaq Green PCR Master Mix (2X). Ampliconii obținuți au fost supuși digestiei cu enzimele BspHI și BstUI, produșii de digestie fiind vizualizați pe gel de agaroză de 1 % cu agent de intercalare GelGreen. Etapele de extragere, de deamplificareși vizualizare a ADN-ului au fost realizate cu dispozitivul Bento Lab. Acest dispozitiv este portabil și combină cele mai importante echipamente necesare pentru realizarea unei reacții de PCR: microcentrifugă, termociclor, casetă pentru electroforeză, bloc de alimentare încorporat și transiluminator. Rezultate. Analiza celor 14 probe a permis identificarea alelelor E+, eși a două genotipuri: E+E+ și E+e. E+reprezintă alela sălbatică și la mistreții de linie pură se întâlnește în formă homozigotă, în timp ce alela e se întâlnește la unii porci domestici. Astfel, genotipul homozigot E+E+a fost identificat în 13 probe, iar genotipul heterozigot E+e–într-o singură probă (specimen hibrid). Protocoalele de lucru au fost optimizate și adaptate la condițiile și la resursele laboratorului. Dispozitivul Bento Laba permis extragerea calitativă a ADN-ului genomic, realizarea reacției de PCR convențional și vizualizarea ADN-ului pe gel de agaroză. Produșii de digestie au putut fi clar vizualizați și au format un tablou electroforetic specific fiecărui genotip. Concluzii. Dispozitivul Bento Labși protocoalele experimentale menționate au fost utilizate cu succes pentru aplicarea metodei RFLP-PCR și genotiparea mistreților, și a permis identificarea unui specimen hibrid din cele 14 probe testate. Studiile de genotipare a mistreților din Republica Moldova ar eficientiza prevenirea focarelor de boli infecțioase (ex. pesta porcină africană), determinarea gradului de hibridizare în populațiile de mistreți și elaborarea măsurilor adecvate de conservare.en_US
dc.language.isoenen_US
dc.publisherAsociația de Biosiguranță și Biosecuritate din Republica Moldovaen_US
dc.relation.ispartofOne Health & Risk Managementen_US
dc.subjectgenotipareen_US
dc.subjectADNen_US
dc.subjectmistrețen_US
dc.subjectMC1Ren_US
dc.subjectBento Laben_US
dc.subjectRFLP-PCRen_US
dc.titleGenotiparea mistrețului cu utilizarea dispozitivului Bento Laben_US
dc.typeOtheren_US
Appears in Collections:One Health & Risk Management noiembrie 2023, Ediție specială

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
654_Manuscript_1622_1_10_20231213.pdf258.39 kBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.

 

Valid XHTML 1.0! DSpace Software Copyright © 2002-2013  Duraspace - Feedback