Compatibility determination of potassium orotate with spironolactone by high-performance liquid chromatography

Abstract

Background. Compatibility determination of active substances in fixed-dose drug combinations is an indispensable step in their elaboration. High-performance liquid chromatography (HPLC) provides information on possible interactions between the components and the occurrence of degradation products. Objective of the study. To investigate the compatibility of potassium orotate with spironolactone in combination by HPLC method. Material and Methods. Liquid Chromatograph Agilent 1100 with UV-VIS detector and RP-18 reverse column (250*4 mm, 5 μm), mobile phase of acetonitrile:phosphate buffer solution (50:50), flow rate 1,5 ml/min, volume of the sample 20 μl, temperature 40°C; potassium orotate and spironolactone substances (Sigma Aldrich, USA). Results. Due to developed method it was carried out the separation and simultaneous determination of the both substances in the mechanical mixture and evaluation of their concentrations. For spironolactone: retention time 6,42 min, concentration 98,1%, RSD=0,21, E=1,2%, symmetry 0,95; for potassium orotate: retention time 1,25 min, concentration 72,8%, RSD=0.12, E=37,3%, symmetry 0,65. The formation of new products in the mixture was not found (lack of additional peaks in the chromatograms). Conclusion. The studied substances are compatible. Studies will be performed by other methods (DSC, FT-IF Spectrophotometry) to confirm the obtained result.

Introducere. Determinarea compatibilităţii substanţelor active în combinațiile cu doze fixe de medicamente este o etapă indispensabilă în elaborarea acestora. Cromatografia de lichide de înaltă presiune (HPLC) oferă informații despre eventualele interacțiuni între componente și apariția produselor de degradare. Scopul lucrării. Evaluarea compatibilității orotatului de potasiu și a spironolactonei în combinație prin metoda HPLC. Material și Metode. Cromatograf de lichide Agilent 1100 cu detector UV-VIS și coloana inversă RP-18 (250*4 mm, 5 μm), faza mobilă acetonitril: soluţie tampon fosfat (50:50), viteza 1,5 ml/min, volumul probei 20 μl, temperatura 40⁰C; substanțe farmaceutice orotat de potasiu și spironolactonă (Sigma Aldrich, SUA). Rezultate. Prin tehnica de lucru elaborată s-a reușit separarea și determinarea concomitentă a substanțelor din amestec mecanic, precum și evaluarea concentrației acestora. Pentru spironolactonă: timp de retenție 6,42 min, concentraţia 98,1%, RSD=0,21, E=1,2%, simetria 0,95; pentru orotat de potasiu: timp de retenție 1,25 min, concentraţia 72,8%, RSD=0,12, E=37,3%, simetria 0,65. Nu se atestă formarea de produse noi în amestec (lipsa picurilor suplimentare pe cromatograme). Concluzii. Substanțele cercetate sunt compatibile. Vor fi efectuate studii și prin alte metode (DSC, Spectrofotometrie FT-IF) pentru confirmarea rezultatului obținut.