Obţinerea și studiul lipozomilor cu conţinut de extract standardizat de Cynara scolymus L.

Abstract

INTRODUCERE. Dezvoltarea sistemelor avansate de administrare a compușilor activi din plante medicinale, utilizind nanotehnologiile moderne, se bazează pe necesitatea amplificării biodisponibilităţii, eficacităţii și stabilităţii acestora [1]. În ultimii ani, în centrele de cercetare, se acordă o atenţie deosebită tehnologiilor de transport a particulelor pe bază de lipozomi, datorită posibilităţilor de restructurare a comportamentului in vivo a principiilor active prin solubilizarea substanţelor slab solubile sau insolubile în apă, fiind încorporate în structuri la scară nanometrică. SCOPUL STUDIULUI. a constat în obţinerea și analiza lipozomilor cu conţinut de extract polifenolic standardizat din Cynara scolymus L. MATERIAL ȘI METODE. Pentru cercetare s-a folosit extractul standardizat din frunze de anghinare (C. scolymus L.) cultivată în colecţia Centrului Știinţifico-Practic în Domeniul Plantelor Medicinale a USMF ”Nicolae Testemiţanu”. Pentru formularea lipozomilor au fost cercetate mai multe amestecuri de polimeri alcătuite din: colesterol, lecitină de soia, Tween 80 și PEG-600. În etapa de obţinere a filmului lipidic s-a utilizat Rotavaporul IKA vacstar RV8, la presiunea de 337 mbar, cu 80 de rotaţii pe minut, la temperatura de 52°C, utilizând metanol ca solvent. Sonicarea a fost realizată cu VWR Ultrasonic Cleaner timp de 15 min la 30°C. Formarea lipozomilor a fost confirmată prin examinarea la microscopul VWR® Compound Binocular Microscope și prin analiza difuziei dinamice a luminii la aparatul Malvern Zetasizer Nano ZS. Toţi reagenţii utilizaţi au fost de calitatea ”chimic pur”, achiziţionaţi de la Sigma-Aldrich. REZULTATE. A fost obţinut extractul uscat de C. scolymus L, standardizat spectrofotometric în conţinut polifenolic (54,27±0,02 mg GAE/g) și flavonoidic (18,72±0,4 mg RU/g). Pentru obţinerea lipozomilor cu aplicarea tehnicii de hidratare în film subţire, urmată de ultrasonicare, au fost analizate mai multe amestecuri de polimeri, în rezultat fiind identificată formula optimă de lucru: colesterol -20 mg, lecitină -50 mg, PEG-600 -50 mg și extract de anghinare -10 mg. Veziculele obţinute au fost observate la microscopul electronic cu determinarea diametrului mediu de 550 nm. Analiza difuziei dinamice a luminii a identificat potenţialul electric al lipozomilor ca fiind 0,8. CONCLUZIE. În rezultatul cercetării au fost obţinuţi lipozomi cu extract standardizat de C. scolymus L. ce prezintă o oportunitate importantă de valorificare a produselor extractive naturale și dezvoltare de noi forme farmaceutice cu biodisponibilitate înaltă.

INTRODUCTION. The development of advanced systems for the administration of active compounds from medicinal plants, using modern nanotechnologies, is based on the need to increase their bioavailability, efficacy and stability [1]. In recent years, special attention has been paid to liposome-based particle transport technologies, due to the possibilities of restructuring the in vivo behavior of active principles by solubilizing poorly soluble or insoluble substances in water, through incorporation into structures at nanometric scale. THE AIM OF STUDY. consisted in obtaining and analyzing the liposomes with standardized polyphenolic extract from Cynara scolymus L. MATERIAL AND METHODS. For the research, the standardized extract of artichoke leaves (C. scolymus L.) cultivated in the collection of the Scientific-Practical Center in the field of Medicinal Plants of Nicolae Testemiţanu SUMPh was used. Several polymer mixtures consisting of: cholesterol, soy lecithin, Tween 80 and PEG-600 were investigated for liposome formulation. In the step of obtaining the lipidic film, the IKA vacstar RV8 Rotavapor, at a pressure of 337 mbar, with 80 rotations per minute, at a temperature of 52°C, with methanol as a solvent, was used. Sonication was performed with VWR Ultrasonic Cleaner for 15 min at 30°C. Liposome formation was confirmed by examination under the VWR® Compound Binocular Microscope and by dynamic light scattering analysis on the Malvern Zetasizer Nano ZS apparatus. All reagents used were of “pure chemical” quality, purchased from Sigma-Aldrich. RESULTS. The dry extract of C. scolymus L was standardized spectrophotometrically in polyphenolic (54.27±0.02 mg GAE/g) and flavonoid content (18.72±0.4 mg RU/g). In order to obtain liposomes, with application of thin film hydration method, followed by ultrasonication, several polymer mixtures were analyzed, as a result the optimal working formula was identified: cholesterol -20 mg, lecithin -50 mg, PEG-600 -50 mg and artichoke extract -10 mg. The obtained vesicles were observed under the electron microscope with the determination of the average diameter of 550 nm. Dynamic light scattering analysis identified the electrical potential of the liposomes as 0.8. CONCLUSIONS. As a result of the research, liposomes with a standardized extract of C. scolymus L. were obtained, which present an important opportunity for the valorization of natural extractive products and development of new pharmaceutical forms with high bioavailability.