Contribuții la cercetarea și validarea metodei de determinare a nicotinei și cotininei cu ajutorul gaz-cromatografiei cuplate cu mass-spectroscopia

Abstract

Rezumat. Nicotina şi cotinina sunt principalii markeri biotoxicologici ce se determină în intoxicaţiile acute şi cronice (tabagismul) la persoanele care fumează sau recurg la tratament substitutiv cu diferite produse farmaceutice pe bază de nicotină (chewing-gum, plasture, spray nazal, inhalator bucal, tablete sublinguale). Obiectivul acestui studiu a fost dezvoltarea şi validarea unei metode GC-MS de determinare a nicotinei şi cotininei din ser (metoda cu standard intern). Determinările au fost efectuate pe un cromatograf de gaze tip Agilent Technologies 7890A echipat cu coloană cromatografică DB5MS, 30 m x 0,25 mm, 0,25 mm. Detecţia s-a realizat prin spectrofotometrie de masă în modul SIM (m/z pentru nicotină: 84 pic de bază, 133 şi 162 pic molecular şi respectiv cotinină: 98 pic de bază, 118 şi 176 pic molecular cu temperatura sursei MSD de 230 °C şi cea a cvadrupolului MSD de 150°C). Metoda validată a fost liniară pe domeniul 1-500 ng/mL, selectivă, exactă şi precisă.

Abstract. The nicotine and the cotinine are the main bio-toxicological markers that are determined in acute and chronic intoxication (tabagism) in people who smoke or use different substitution treatments based on nicotine (chewing-gum, patch, nasal spray, oral inhaler, sublingual tablet ). The objective of this study was to develop and validate a GC-MS method for nicotine and cotinine determination in serum (a method with an internal standard). Measurements were performed on a gas chromatograph Agilent Technologies 7890 equipped with a DB 5 MS chromatographic column ( 30 m x 0.25 mm, 0.25 mm film thickness). Detection was performed by mass spectrometry in SIM mode (m / z for nicotine: 84 basic peak, 133 and 162 molecular peak and m / z for cotinine: 98 basic peak, 118 and 176 molecular peak; the temperature of the MSD source was 230°C and that of the MSD qvadrupol was 150 ° C). The validated method was linear in the range 1-500 ng / mL, selective, accurate and precise.