Determinarea purității dioxoindolinonei prin metoda cromatografiei lichide de înaltă presiune

Abstract

Introducere. Verificarea purității reprezintă o cerință esențială pentru asigurarea calității produselor farmaceutice, deoarece impuritățile pot diminua eficiența terapeutică și pot compromite siguranța acestora. Scopul lucrării. Elaborarea metodei HPLC pentru determinarea impurităților specifice în Dioxoindolinonă – produs autohton, derivat al izatinei cu un potențial farmacologic important (acțiune de inhibiție a MAO). Material și metode. Drept obiect de studiu au servit Dioxoindolinona (1'-(2-oxo-propil)- spiro[[1,3]dioxolane-2',3'-indolin]-2'-one), serii experimentale de sinteză și impuritățile specifice posibile (izatina – substanța inițială, ketal izatina – produs intermediar și acetonida – produs de descompunere); cromatograful de lichide Shimadzu LC-20AD cu UV-detector SPD-20A, solvenți și reagenți în corespundere cu cerințele Farmacopeei Europene. Rezultate. Cercetarea s-a efectuat pe un amestec-model, alcătuit din soluțiile a substanței de analizat și posibilele impurități (30 µg/ml) luate în părți egale. Condițiile cromatografice: coloana Nucleodur C18 – 5 µm (100 mm x 4 mm), detectorUV-VIS,lungimea de undă 258nm, temperatura coloanei 30 0C, debitul fazei mobile 1,0 mL/min, volumul de injecție 20 µl; faza mobilă: acetonitril:metanol:acid fosforic 0,1%: apă – 25:15:30:30, cu eluție izocratică; timpul de retenție pentru Dioxoindolinonă 4,0. Condițiile cromatografice selectate permit o separare satisfăcătoare a impurităților specifice de substanța de analizat (rezoluția 3,9). Valoarea ariei picului oricărei impurități prezente pe cromatograma soluției de analizat este cel mult 1,5% față de aria picului a soluției standard de Dioxoindolinonă. Concluzii. Metoda elaborată poate fi utilizată pentru identificarea și dozarea atât a substanței active cât și a impurităților specifice și a produșilor de degradare, în timpul analizelor de rutină, dar și pe parcursul studiilor de stabilitate pentru Dioxoindolinonă.

Introduction. Purity verification is an essential requirement for ensuring the quality of pharmaceutical products, as impurities can reduce therapeutic effectiveness and compromise their safety. Aim of the study. Development of the HPLC method for the determination of specific impurities in Dioxoindolinone – native product, derivative of isatin with an important pharmacological potential (MAO inhibition action). Material and methods. Dioxoindolinone (1'-(2-oxo-propyl)-spiro[[1,3]dioxolane-2',3'- indolin]-2'-one), experimental synthesis series and specific impurities served as the object of study possible (isatin – initial substance, ketal isatin – intermediate product and acetonide – decomposition product); Shimadzu LC-20AD liquid chromatograph with UVdetector SPD-20A, solvents and reagents in accordance with the requirements of the European Pharmacopoeia. Results. The research was performed using a model solution, composing of the analysed substance and possible impurities (30 µg/ml)in equal parts. Chromatography conditions: Nucleodur column C18 – 5 µm (100 mm x 4 mm), UV-VIS detector, 258 nm wavelength, column temperature of 30 0C, debit of the mobile phase 1,0 mL/min, injection volume 20 µl; mobile phase: acetonitril:metanol:phosphoric acid 0,1%: apă – 25:15:30:30, with isocratic elution; retention time for Dioxoindolinone 4.0. The selected chromatography conditions allow a satisfying isolation of the specific impurities from the analysed substance (resolution 3,9). The value of the peak area of any impurity present on the chromatogram of the analyzed solution is at most 1.5% of the peak area of the Dioxoindolinone standard solution. Conclusions. The elaborated method allowed the determination and dosing of specific impurities in Dioxoindolinone and will serve as support for the compilation of the Analytical Normative Documentation for this substance.