Biochemical, genetic diagnosis and therapeutic programs of hemophilia in children: Summary of the PhD thesis in medical sciences: 322.01- Paediatrics and neonatology

Abstract

Structure of the thesis. The thesis comprises 146 pages and consists of an introduction, 6 chapters, discussions, general conclusions, recommendations, and a bibliography citing 139 sources. The iconographic material includes 37 tables, 15 figures, and 4 annexes. The scientific results obtained were reflected in 25 publications. Keywords: hemophilia, coagulation, factor VIII, factor IX, bleeding, hemarthrosis, inhibitors, moleculargenetic mutation, aPTT, recombinant and lyophilized replacement factor. Field of study: pediatrics and neonatology – 322.01. Aim of the study. To analyze the clinical manifestations, biochemical and genetic parameters in the diagnosis of hemophilia A and B in children, with the goal of optimizing paraclinical diagnosis and developing an individualized therapeutic model adapted to the type and severity of the disease. Objectives of the study. Analysis of clinical manifestations of hypocoagulation syndrome in children with hemophilia; determination of quantitative and qualitative levels of coagulation factors in hemophilia A and B; analysis of the relationship between clinical manifestations (phenotype) and genetic changes (genotype) in pediatric hemophilia to strengthen the utility of genetic diagnosis; evaluation of the presence of coagulation factor VIII and IX inhibitors and determination of their titers in the context of therapeutic management; comparative analysis of the efficacy and safety of replacement therapy with lyophilized/recombinant factors VIII/IX and cryoprecipitate for optimizing treatment approaches; development of a database on the web platform “Electronic Registry of Patients with Hemophilia in the Republic of Moldova.” Scientific novelty. For the first time in the Republic of Moldova, a comprehensive study of pediatric patients with hemophilia was carried out, focusing on clinico-paraclinical features and the identification of specific genetic mutations. The severity of hemophilia (based on clinical data and factor VIII/IX levels) was analyzed in association with identified mutations; titration of factor VIII and IX inhibitors in children was performed; and the National Registry for Monitoring Patients with Hemophilia was developed. Theoretical significance. For the first time nationally, clinico-paraclinical features of hemophilia in children were analyzed, highlighting manifestations by severity and classifying genetic mutations associated with hemophilia A and B. The titers of coagulation inhibitors (factors VIII and IX) were determined for the first time, and their correlation with genetic and clinical data provided a theoretical basis for understanding phenotypic variability. Modern directions for integrated diagnosis and therapeutic management were proposed, and the datebase for National Monitoring Registry was developed to systematize and standardize data on this rare disease. Practical significance. The study demonstrates the importance of genetic testing in hemophilia A and B for the early identification of severe forms and for guiding personalized therapy. Determination of inhibitor titers against factors VIII and IX supports prevention and management of substitution therapy complications, including the use of emicizumab in patients with inhibitors. The results contribute to the optimization of therapeutic and prophylactic protocols, while the creation of the datebase for National Monitoring Registry provides a practical tool for patient surveillance, planning, and for supporting public health policies regarding rare diseases in the Republic of Moldova. Implementation of results. The findings have been integrated into the practice of the Department of Benign Hemopathies at IMSP Mother and Child Institute and specialized clinics of IMSP Oncology Institute in the Republic of Moldova, as well as into the educational process at the “Nicolae Testemițanu” State University of Medicine and Pharmacy, contributing to the theoretical and practical training of specialists in this field.

Structura tezei:Teza include 146 de pagini și constă din introducere, 6 capitole, discuții, concluzii generale, recomandări, bibliografie care citează 139 de titluri. Materialul iconografic conține: 37 de tabele, 15 de figuri, 4 anexe. Rezultatele științifice obținute au fost reflectate în 25 de lucrări ştiinţifice. Cuvinte-cheie: hemofilie, coagulare, factorul VIII, factorul IX, hemoragie, hemartroză, inhibitori, mutație molecular-genetică, TTPA, factor de substituție recombinat și liofilizat. Domeniul de studiu: pediatrie şi neonatologie – 322.01. Scopul lucrării: Analiza manifestărilor clinice, a parametrilor biochimici și genetici în diagnosticul hemofiliei A și B la copii, cu scopul optimizării diagnosticului paraclinic și al ajustării unui model terapeutic individualizat, adaptat formei și severității bolii. Obiectivele lucrării: Analiza manifestărilor clinice ale sindromului de hipocoagulare la copiii cu hemofilie; Determinarea nivelurilor cantitative și calitative ale factorilor de coagulare în hemofilia A și B la copii; Analiza relației dintre manifestările clinice (fenotip) și modificările genetice (genotip) în hemofilie la copii pentru aplificarea utilității diagnosticului genetic; Evaluarea prezenței inhibitorilor factorilor de coagulare VIII și IX la pacienții cu hemofilie și determinarea titrului acestora în contextul managementului terapeutic; Analiza comparativă a eficienței și siguranței terapiei de substituție cu factori VIII/IX liofilizat/recombinat și crioprecipitat în tratamentul hemofiliei pentru optimizarea abordării terapeutice a deficitului de factori de coagulare; Elaborarea Bazei de date pe platforma website-ului „Registrul electronic al pacienților cu hemofilie în Republica Moldova”. Noutatea științifică a lucrării. Pentru prima dată în Republica Moldova a fost realizat un studiu amplu al pacienților pediatrici cu hemofilie, autorul concentrându-se pe evaluarea particularităților clinicoparaclinice, pe identificarea modificărilor genetice specifice; a fost efectuată analiza severității hemofiliei (evaluată prin date clinice și nivelurile factorilor VIII și IX), asociată cu mutațiile genetice identificate; s-a făcut titrarea inhibitorilor factorilor de coagulare VIII și IX la copiii cu hemofilie; a fost elaborată baza web pentru Registrul Național de Monitorizare a Pacienților cu Hemofilie din Republica Moldova. Semnificația teoretică a lucrării. În premieră națională au fost analizate particularitățile clinicoparaclinice ale hemofiliei la copii în Republica Moldova, cu identificarea manifestărilor specifice în funcție de severitatea bolii; au fost identificate și clasificate mutațiile genetice asociate hemofiliei A și B, cu evidențierea frecvenței acestora în raport cu forma clinică (severă, moderată, ușoară); pentru prima dată a fost determinat titrul inhibitorilor factorilor de coagulare VIII și IX la copiii cu hemofilie; au fost analizate relațiile dintre datele genetice, titrul de inhibitori și severitatea manifestărilor clinice, oferind o bază teoretică pentru înțelegerea variabilității fenotipice a hemofiliei; propuse direcții moderne ale diagnosticului și ale managementului terapeutic al hemofiliei, bazate pe integrarea datelor clinice, genetice și imunologice; a fost elaborată baza web pentru Registrul Național de Monitorizare a Pacienților cu Hemofilie, care are scopul de a contribui la sistematizarea și uniformizarea datelor privind această patologie rară. Valoarea aplicativă a lucrării. A fost fundamentată necesitatea testării genetice al hemofiliei A și B, cu scopul de a facilita identificarea timpurie a formelor severe. Rezultatele permit orientarea terapeutică personalizată, adaptată profilului genetic și imunologic al pacientului cu hemofilie. Determinarea titrului inhibitorilor factorilor de coagulare VIII și IX oferă suport esențial în prevenirea și managementul complicațiilor tratamentului de substituție, inclusiv în alegerea unor alternative terapeutice precum utilizarea emicizumab, un anticorp monoclonal bispecific care permite bypassarea factorului VIII și asigură un control eficient al hemoragiilor la pacienții cu inhibitori. Rezultatele obținute contribuie la optimizarea protocoalelor terapeutice și a strategiilor profilactice în hemofilia pediatrică. Elaborarea bazei web pentru Registrul Național de Monitorizare a Pacienților cu Hemofilie reprezintă un instrument aplicativ util pentru supravegherea continuă, evaluarea epidemiologică și planificarea tratamentului la pacientul cu hemofilie. Lucrarea oferă un suport științific valoros pentru elaborarea politicilor de sănătate publică privind bolile rare în Republica Moldova. Implementarea rezultatelor. Rezultatele cercetării sunt integrate în practica secției de Hemopatii benigne din cadrul IMSP Institutul Mamei și Copilului și în practica clinicilor specializate ale IMSP Institutul Oncologic din Republica Moldova; în procesul didactic al USMF „Nicolae Testemițanu”, contribuind la pregătirea teoretică și practică a specialiștilor din domeniu.