Development and validation of the high-pressure liquid chromatography method for propyltiohinotiadiazol dosage

Abstract

Background. Propylthiohinothiadiazole is a thiadiazole derivative with pronounced antimycobacterial action. Substance is researched in order to develop methods of analysis and standardization, analytical documents regulating quality for use as an active principle in the development of pharmaceutical forms. Objective of the study. Elaboration of the work technique and validation of the HPLC method for dosing propylthiohinothiadiazole. Material and Methods. 3 series of propylthiohinothiadiazole, internal reference standard of 2-(propylthio)-5H-[1,3,4]-thiadiazole[2,3-b]-quinazolin-5-one substance with concentration 99,98%, chromatographic system Shimadzu LC-20AD HPLC with UVVIS detector, acetonitrile and dimethylsulfoxide of purity grade “pro HPLC analysis” (Sigma Aldrih and Merck), bidistilled purified water. Results. Linearity is proved for concentrations of 5-30 μg/ml, the linear regression equation is y=36472x-44580, R²=0.9929. The limit of detection is 0,729 μg/ml and the limit of quantification is 2,210 μg/ml. It was established that the method is accurate (mean recovery values at 80%, 100% and 120% concentration levels were close to 100%. The accuracy of the method was expressed by repeatability and intermediate accuracy. The variation of the chromatographic conditions established that the method is robust. For all validation parameters, RSD was less than 1. Conclusion. The validation results show that the developed HPLC method is simple, fast, accurate and reproducible.

Introducere. Propiltiohinotiadiazolul este un derivat de tiadiazol cu acțiune antimicobacteriană pronunțată. Substanța este cercetată în vederea elaborării metodelor de analiză și standardizare a documentelor analitice de normare a calității pentru utilizare în calitate de principiu activ la elaborarea formelor farmaceutice. Scopul lucrării. Elaborarea tehnicii de lucru și validarea metodei HPLC de dozare a propiltiohinotiadiazolului. Material și Metode. 3 serii de substanță propiltiohinotiadiazol, standard de referință intern de 2-(propiltio)-5H-[1,3,4]-tiadiazol[2,3-b]-quinazolin-5-onă substanţă cu concentrația 99,98%, sistemul cromatografic HPLC Shimadzu LC-20AD cu detector UVVIS, acetonitril și dimetilsulfoxid grad de puritate „pro HPLC analysis” (Sigma Aldrih și Merck), apă purificată bidistilată. Rezultate. Linearitatea se respectă pentru concentrații de 5-30 μg/ml, ecuația regresiei lineare este y = 36472x – 44580, R² = 0,9929. Valoarea limitei de detecție este de 0,729 μg/ml și a limitei de cuantificare de 2,210 μg/ml. S-a stabilit că metoda este exactă (valorile medii ale recuperării la nivelele de concentraţie 80%, 100% şi 120% au fost apropiate de 100%). Precizia metodei a fost exprimată prin repetabilitate şi precizie intermediară. La variația condițiilor cromatografice s-a stabilit că metoda este robustă. Pentru toți parametrii de validare RSD a fost mai mic de 1. Concluzii. Rezultatele validării denotă că metoda HPLC elaborată este simplă, rapidă, exactă şi reproductibilă.