Rezumat
Introducere. În zilele noastre, o provocare majoră și actuală
în medicină reprezintă problema prevenirii complicațiilor
infecțioase, cauzate de bacteriile gram-negative multi-rezistente
la antibiotice. Rezistența emergentă a agenților patogeni
predominanți, ca Acinetobacter baumannii, Enterobacteria,
Pseudomonas aeruginosa, corespunde producției de metalic β-lactamază (MβL), hidrolizei carbapenemelor, fiind frecvent
codificată de genele VIM.
Material și metode. Pe parcursul anilor 2011-2016, au
fost izolate tulpini clinice de microorganisme, anterior de
inițierea terapiei antibacteriene, de la pacienți în stare critică
(n=441) cu arsuri de gradul IIb și III. Au fost utilizate metode
standard de identificare. Testarea sensibilității antimicrobiene
la imipenem și meropenem a tulpinilor de A. baumannii, P.
aeruginosa, P. mirabilis a fost efectuată conform normativelor
ghidurilor EUCAST. Screening-ul pentru producția de MβL a
fost realizat, utilizând testul Double Disk Synergy. Genele VIM
în tulpinile izolate de bacterii au fost identificate molecular
prin reacția de polimerizare în lanț în timp real. A fost studiată
influența utilizării combinate a concentrațiilor inhibitorii
sub-minime (sub-MIC) de antiseptic decamethoxinum (diclorură
de 1,10-decametilen-bis (N, N-dimetil mentoxicarbonilmetil-
amoniu) asupra sensibilității tulpinilor clinice la carbapeneme.
Rezultate. Studiul de șase ani a relevat patogenii
predominanți în complicațiile infecțioase: A. baumannii
(n=220; 34,26%), P. aeruginosa (n=127; 19,78%) și P. mirabilis
(n=34; 5,30%) dintre totalul de 642 de tulpini clinice, obținute
de la pacienți cu arsuri, în stare critică. Rezistența la carbapenem
a fost confirmată în 27,41% de tulpini izolate clinic dintre
totalitatea de agenți patogeni înregistrați. Apariția rezistenței
la imipenem și meropenem s-a constatat în tulpinile clinice de
A. baumannii (n=111 și, respectiv, n=126), P. aeruginosa (n=43
și, respectiv, n=48) și P. mirabilis (n=1 și n=2, respectiv). Dintre
acestea, rezistența fenotipică la carbapenem, asociată cu producerea
de MβL, a fost demonstrată la A. baumannii (36,81%),
P. aeruginosa (33,86%) și P. mirabilis (8,82%). Rezistența mediată
de MβL s-a dovedit a fi legată de gena VIM în A. baumannii
(1,36%), P. aeruginosa (4,72%), P. mirabilis (8,82%). A fost
constatată recuperarea sensibilității bacteriilor gram-negative
studiate la imipenem și meropenem de 3,09-7,07 ori, după
ce a fost utilizat sub-MIC de decamethoxinum. De asemenea,
după utilizarea sub-MIC de DCM în culturile izolate, a fost înregistrată
dispariția genelor VIM, detectate, initial, prin PCR.
Concluzie. Bacilii gram-negativi: A. baumannii (34,26%),
P. aeruginosa (19,78%) și P. mirabilis (5,30%), cauzează frecvent
complicații infecțioase la pacienții cu arsuri și dezvoltă
rezistență la carbapeneme, asociată genelor VIM, care codifică
MβL. Combinația sub-MIC de antiseptic decamethoxinum cu
carbapeneme demonstrează în mod semnificativ eficacitatea,
in vitro, împotriva bacteriilor gram-negative rezistente.
Abstract Introduction. Nowadays, the problem of prevention of
infectious complications, caused by multi-antibiotic-resistant
opportunistic Gram-negative bacteria is of great importance
and actuality in medicine. The emerging resistance of leading
pathogens as Acinetobacter baumannii, Enterobacteria,
Pseudomonas aeruginosa corresponds to the production of metallic-β-lactamase (MβL), hydrolysing carbapenems, frequently
encoded by VIM gens.
Material and methods. From critically ill patients (n=441)
with 2ndb 3rd degree burns clinical strains of microorganisms
had been isolated before antibiotic therapy in 2011-2016
years. They were identified accordingly to standard methods.
The antimicrobial susceptibility testing to imipenem and meropenem
was done in all received strains of A. baumannii, P.
aeruginosa, P. mirabilis according to guidelines EUCAST expert
rules. Screening for MβL production was done employing
Double Disk Synergy Test. In isolated strains of bacteria
the molecular identification of VIM gens, was carried out by
real-time polymerase chain reaction. The influence of combined
use of sub-minimal inhibitory concentrations (sub-MIC)
of antiseptic decamethoxinum (1,10-dekametilen-bis (N,Ndimethyl
mentoksikarbonilmetil)-ammonium dichloride) on
the susceptibility of clinical strains to carbapenem antibiotics.
Results. The six-year trial demonstrated that A. baumannii
(n=220; 34.26%), P. aeruginosa (n=127; 19.78%) and P.
mirabilis (n=34; 5.30%) were predominant causative agents
of infection complications among total of 642 clinical strains,
received from critical patients with burns. Carbapenem resistance
was confirmed in 27.41% of clinical isolates of totally
registered pathogens. The occurrence of resistance to imipenem
and meropenem was found in clinical strains of A. baumannii
(n=111 and n=126, respectively), P. aeruginosa (n=43
and n=48, respectively), P. mirabilis (n=1 and n=2, respectively).
Among them the phenotypic resistance, related with production
of MβL to carbapenems was proved in A. baumannii
(36.81 %), P. aeruginosa (33.86%) and P. mirabilis (8.82%).
The MβL-mediated resistance was proved to be related with
VIM-gens in A. baumannii (1.36%), P. aeruginosa (4.72%), P.
mirabilis (8.82%). There was found the retrieval of the susceptibility
of studied Gram-negative bacteria to imipenem and
meropenem in 3.09-7.07 times after sub-MIC of decamethoxinum
had been used. We also registered the disappearance of
VIM gens after the use of sub-MIC of DCM in cultures of those
isolates, which primarily had been detected by the PCR.
Conclusion. Gram-negative bacteria as A. baumannii
(34.26%), P. aeruginosa (19.78%) and P. mirabilis (5.30%), frequently
cause infection complications in patients with burns,
and obtain resistance to carbapenems related with VIM genes,
coding for MβL. The combination of sub-MIC of antiseptic decamethoxinum
with carbapenems significantly reveals in vitro
their effectiveness against resistant Gram-negative bacteria.
