Hiperhomocisteinemia şi polimorfismul MTHFR C677T, MTHFR A1298C, MTRR A66G, MTR A2756G ca potenţiali factori de risc în dezvoltarea avortului spontan recurent

Abstract

Introducere. Homocisteina şi expresia genelor metionin–sintetaza (MTR), metilen-tetrahidrofolat–reductaza (MTHFR) şi metionin–sintetaza–reductaza (MTRR) ce codifi că proteinele implicate în metabolismul homocisteinei şi metioninei constitue factori de risc pentru producerea avortului spontan recurent. Scop. Aprecierea şi asocierea hiperhomocisteinemiei şi polimorfismelor genetice MTHFR C677T, MTHFR A1298C, MTRR A66G, MTR A2756G cu pierderea recurentă de sarcină. Materiale şi metode. În prezenta cercetare a fost proiectat un studiu de cohortă, realizat pe un lot de cercetare, care a cuprins 57 de femei cu avorturi spontane în antecedente. Criteriile de includere în cercetare au fost: vârsta femeilor – 20-45 ani; paciente cu cel puţin 2 avorturi spontane consecutive de cauză neprecizată în antecedente. Rezultatele obţinute au fost raportate la cele din lotul de control, format din 57 de femei fără avorturi spontane în antecedente. Criteriile de includere în cercetare au fost: vârsta femeilor – 20-45 ani; femei cu cel puţin 1 sarcină fiziologică şi naştere la termen în antecedente. Homocisteina serică totală a fost determinată prin metoda chemiluminiscenţă. Pentru testarea genetică a polimorfismelor MTHFR C677T, MTHFR A1298C, MTRR A66G, MTR A2756G s-au realizat reacţiile PCR/RFLP (reacţie de polimerizare în lanţ şi polimorfismul lungimii fragmentelor de resctricţie). Datele primare au fost procesate prin intermediul aplicaţiei Excel (din pachetul Microsoft Office 2010). Semnificaţia statistică pentru a fost stabilită prin calcularea riscului relativ (RR) şi intervalului de încredere pentru 95% (IÎ95). Rezultatele studiului. Valoarea medie a nivelului seric de homocisteină totală în lotul de control a fost de 6,90±0,40 μmol/l, iar în lotul de bază aceasta a constituit 13,31±0,87 μmol/l, constatându-se semnificaţie statistică înalt semnificativă cu p< 0.0001. În acest context a fost apreciat RR şi s-a constatat că RR de avort spontan recurent în cazul pacientelor cu hiperhomocisteinemie are valoare de 10,4 cu IÎ95 6,76-14,04. Astfel, pacientele cu hiperhomocisteinemei prezintă riscul de a dezvolta avort spontan recurent de 10,4 mai mare decât femeile din lotul de control (RR = 10,4). Analiza genotipurilor polimorfismelor testate a permis identificarea mutaţiilor în genele MTHFR, MTR şi MTRR în 98,25±0,98% semnificativ statistic la pacientele cu avort spontan recurent faţă de lotul martor (p >0.001). În continuare, am analizat RR pentru fiecare polimorfism genetic în parte, presupuse a infl uenţa dezvoltarea avortului spontan recurent. Astefl, RR prezintă de câte ori este mai mare probabilitatea de a face avort spontan recurent la pacientele cu mutaţia prezentă, decât la cele cu mutaţia absentă. În cazul genotipurilor mutante heterozigot CT şi homozigot mutant TT pentru polimorfismul genetic MTHFR C677T, RR are valoarea de 2,46 cu IÎ95 1.30 – 3,61, deci riscul este apreciat ca fiind dublu în prezenţa mutaţiei. Pentru genotipurile mutante heterozigot AC şi homozigot mutant CC pentru polimorfismul genetic MTHFR A1298C, RR are valoarea de 3,0 cu IÎ95 1.62 – 4,38, riscul este apreciat ca fiind triplu în prezenţa mutaţiei respective. RR de avort spontan recurent în cazul pacientelor pentru mutaţia heterozigotă AG şi homozigotă mutantă GG pentru polimorfismul MTR A2756G comparativ cu genotipul normal AA are valoare de 4,71 cu IÎ95 2,07 – 7,34, deci riscul este apreciat ca fiind de 4 ori mai mare în prezenţa mutaţiei. Pentru polimorfismul genetic MTRR A66G, genotipurile mutante heterozigot AG şi homozigot mutant GG determină, de asemenea, un risc de 4 ori mai mare în prezenţa mutaţiei comparative cu genotipul normal AA, valoarea RR fi ind 4,72 cu IÎ95 3,11 – 6,32. RR în cazul polimorfismelor asociate a constituit 7,93 cu IÎ95 3,94 – 15,98, deci riscul este apreciat ca fi ind de 8 ori mai mare în prezenţa polimorfismelor asociate. Concluzii. Rezultatele cercetării efectuate arată tendinţa de asociere a valorilor crescute ale homocisteinei (RR=10,4), genotipurilor mutante pentru polimorfismele MTHFR C677T (RR=2,47), MTHFR A1298C (RR=3,0), MTR A2756G (RR=4,71) şi MTRR A66G (RR=4,72) cu pierderea recurentă spontană a sarcinii.