Introduction: Mitochondrial diseases (MD) are a group of rare, genetically inherited disorders caused by defects in
mitochondrial function, particularly in oxidative phosphorylation, leading to impaired cellular energy production
and a wide range of clinical manifestations affecting multiple organ systems, with an estimated prevalence of 1 in
5,000 individuals.
Materials and methods: A cohort of 240 patients suspected of mitochondrial disease underwent clinical, biochemical, and genetic evaluations. All patients underwent selective screening for 8 common mutations via quantitative
PCR high-resolution melting (qPCR-HRM) analysis, followed by Sanger sequencing. Descriptive statistics assessed
the distribution of clinical, biochemical, and genetic variables.
Results: Comprehensive biochemical assessments uncovered significant metabolic perturbations, characterized by
disruptions in amino acid profiles (11,6%), elevated lactate levels (45%), and alterations in mitochondrial function
biomarkers (27%). A targeted genetic screening utilizing the qPCR-HRM technique enabled the identification of
pathogenic mtDNA mutations in eight patients, specifically m.3243A>G (n=3), m.8993T>G (n=2), m.3460G>A
(n=2), and m.11778G>A (n=1). In instances where individuals met the diagnostic criteria for MD but exhibited
no detectable mtDNA abnormalities via qPCR-HRM, an extensive investigation of the mitochondrial genome was
conducted through Sanger sequencing. This high-resolution sequencing approach, encompassing 21 mtDNA genes,
was applied to 84 patients (35%), leading to the identification of pathogenic or likely pathogenic variants associated
with mitochondrial dysfunction in 33 cases (~39%).
Conclusion: In the cohort of 240 patients referred for the evaluation of clinically suspected MD, pathogenic and
potentially pathogenic variants associated with the patients’ phenotype were identified in 41 patients (~17%).
Introducere: Bolile mitocondriale (BM) sunt afecțiuni genetice rare, cauzate de anomalii în funcționarea mitocondrială, în special în fosforilarea oxidativă, care afectează producția de energie celulară și determină manifestări
clinice variate ce afectează multiple sisteme organice, cu o prevalență estimată de 1 la 5.000 de indivizi.
Materiale și metode: Un grup de 240 de pacienți cu fenotip caracteristic maladiilor mitocondriale a fost supus
evaluărilor clinice, biochimice și genetice. Toți pacienții au fost supuși unui screening selectiv pentru 8 mutații
frecvente utilizând qPCR-HRM (PCR cantitativ cu topire de înaltă rezoluție), urmat de secvențierea Sanger. Analiza
statistică descriptivă a fost utilizată pentru a examina distribuția frecvențelor și procentajelor variabilelor clinice,
biochimice și genetice.Rezultate: Evaluările biochimice au permis evidențierea unor perturbări metabolice semnificative, incluzând disfuncții ale profilurilor de aminoacizi (11,6%), creșteri anormale ale nivelurilor de lactat (45%) și modificări ale
biomarkerilor funcției mitocondriale (27%). Screening-ul genetic selectiv, realizat prin tehnica qPCR-HRM, a
permis identificarea unor mutații patogene ale ADN-ului mitocondrial (ADNmt) la opt pacienți (3,3%), respectiv
m.3243A>G (n=3), m.8993T>G (n=2), m.3460G>A (n=2) și m.11778G>A (n=1). În cazurile în care pacienții au
îndeplinit criteriile diagnostice pentru BM, dar nu au prezentat anomalii la analiza ADNmt prin qPCR-HRM, s-a
realizat secvențierea Sanger parțială a genomului mitocondrial. Secvențierea Sanger a 21 de gene ale ADNmt, aplicată unui lot de 84 de pacienți (35%), a dus la identificarea unor variante patogene sau probabil patogene, corelate
cu disfuncția mitocondrială, în 33 de cazuri (~39%).
Concluzii: În cohorta de 240 de pacienți, variante patogene și potențial patogene asociate cu fenotipul pacienților
au fost identificate în 41 de cazuri (~17%).